Chemically defined mineral medium for Lactobacillus reuteri

Abstract: KEMISKT DEFINIERAT MINERALMEDIUM FÖR LACTOBACILLUS REUTERI ELINA BROMELL Bromell, E. Kemiskt definierat mineralmedium för Lactobacillus reuteri. Examensarbete i biomedicinsk laboratorievetenskap 15 högskolepoäng. Malmö universitet: Fakulteten för hälsa och samhälle, institutionen för biomedicinsk laboratorievetenskap, 2020. Släktet Lactobacillus har flera arter som anses ha probiotisk effekt, däribland Lactobacillus reuteri. L. reuteri har positiva effekter på munhälsa, vid förstoppning, spädbarnskolik och atopiskt eksem. Bakterien behöver vara robust nog att tolerera frystorkning, transport och de syror och enzymer den kan utsättas för i magtarmkanalen och behöver därtill vara livskraftig nog att kunna verka i det tilltänkta området. Viabilitet och tolerans kan påverkas positivt, bl.a. genom att förstärka bakteriens membran. Membranen kan förstärkas genom att förbättra odlingsförhållanden och odlingsmedium. För att kunna förbättra odlingsmediumet på detaljnivå behöver det vara kemiskt definierat. Eftersom det finns ett semi-definierat medium, SD4, för L. reuteri blir det första steget att byta ut de odefinierade komponenterna i SD4 till definierade alternativ. Syftet med studien var att tillverka ett kemiskt definierat mineralmedium för L. reuteri. Metoden var att ersätta Casamino acids i SD4 med alla 20 aminosyror, glutathion och en kvävekälla. One-Factor-At a-Time (OFAT) tillämpades genom att utesluta en aminosyra i taget och på så sätt se vilka som är essentiella för tillväxt. Experimenten resulterade i ett odlingsmedium med di-ammoniumcitrat som kvävekälla och 14 aminosyror, essentiella för tillväxt. Studien konkluderade att ett nytt semidefinierat odlingsmedium för L. reuteri har tagits fram. Mediumet är fortfarande semidefinierat då Tween 80™ inte ersatts med definierade fettsyror. Eftersom kraven på näring kan skilja mellan olika stammar är detta medium än så länge bara definierat för L. reuteri DSM 17938. Nyckelord: aminosyror, definierat mineralmedium, Lactobacillus reuteri DSM 17938, mediumoptimering, OFAT.