Bioprocess development

Abstract: Syftet med denna studie var att undersöka möjligheten av att odla mammalieceller in mikrotiter format. Vidare har jag undersökt effekten av dIGF-I och AE-IGF-I i förhållande till hrIGF-I och insulin om proliferation av 293-F celler. Nivån av förbättrat proteinuttryck har också studerats. En ansats med odling i mikrotiterplatta undersöktes för bioprocessutveckling. Det största hindret med att odla i mikrotiter format var den alltför stora vätskeavdunstning från brunnarna. Cellodling i mikrotiterplattor är en process som lätt skulle kunna automatiseras och möjliggöra att flera experiment görs samtidigt. Samtidigt skulle det erbjuda betydande förbättringar i experimental genomströmning, såsom att få viktig nyckel data mycket snabbare och eliminera slöseri och kostnader i ett tidigt skede processutveckling. Resultaten visar att dIGF-jag har kapacitet att främja produktion av rekombinanta proteiner från 293-F celler i serumfria kulturer, i koncentrationer 400 och 100 gånger lägre än vad som krävs av insulin. Även AEIGF- I stimulerade proteinproduktion bättre än insulin, vid 20-faldigt lägre koncentrationer. IGF-I varianterna visade även likvärdig eller bättre prestanda än insulin när det gäller celltillväxt och viabilitet och är mycket potenta och effektiva alternativ. Fler experiment hade behövt göras för att få en bättre förståelse för dIGF-I och AE-IGF-I om deras potential som tillväxtfaktorer. Denna studie bör uppmuntra till ytterligare forskning om potentialiteten av mammaliecells odling i mikrotiter format med tillsättning av tillväxtfaktorer för bättre proteinproduktion och cellprolifiering.